胱抑素CElisa試劑盒測定方法比較
1、胱抑素CElisa試劑盒概述
胱抑素CElisa試劑盒在雞蛋清中分離純化得到高純度的半蛋白酶抑制劑(cysteine proteinase inhibitor ,CPI) ,后被命名為胱抑素C.它由122 個氨基酸組成,帶正電荷,等位點為9.3,是一種堿性非糖化的低分子蛋白,相對分子質(zhì)量為13300.胱抑素C 是半蛋白酶抑制劑家族中的一員,編碼血清胱抑素 C的基因位于20 號染色體短臂,長約615kb,屬于管家基因,能在所有有核細胞中以恒定的速率轉(zhuǎn)錄表達。胱抑素C 是一種分泌性蛋白,廣泛存在于各種體液中,如腦脊液、唾液、尿液、精液等, 其中精液和腦脊液中的濃度zui高, 尿液中zui低[1],胱抑素C 能夠自由通過腎小球, 并且由腎小管重吸收后降解,生理情況下幾乎沒有影響胱抑素C穩(wěn)定的因素。胱抑素具有產(chǎn)生速率恒定、只能通過腎小球濾過排泄,在腎小管內(nèi)*被重吸收降解[2],這一特點使得血清胱抑素 C成為引人注目的腎臟腎小球濾過率(glomerular filtration rate. GFR)的替代標志物。
2、胱抑素CElisa試劑盒測定
2.1 胱抑素CElisa試劑盒測定方法比較
胱抑素C的測定目前有單向免疫擴散法(RID)、放射免疫法(RIA)、時間分辨熒光免疫法( TRFIA)、酶免疫測定法( EIA)、乳膠顆粒增強免疫比濁法(PETIA)等。
從測定速度方面講,RID法、RIA法、TRFIA法、ELISA法均較耗時,PETIA法則只需幾分鐘就可完成整個分析過程。從靈敏度而言,RID法zui差,而RIA法、TRFIA法、ELISA法均優(yōu)于PETIA法。RIA法存在放射性污染,F(xiàn)TFIA法需要較貴的儀器,ELISA法無法適應臨床大批量的標本的需求。PETIA法可實現(xiàn)自動化,雖檢測靈敏度差些,但可達到150ug/L,遠遠底低于健康人的下限,可滿足臨床的要求[3].
2.2胱抑素CElisa試劑盒干擾因素分析
大量國內(nèi)外文獻報導血清胱抑素 C受影響因素較小,Gokkusu等認為其不受性別,肌肉量的變化和慢性炎癥的影響是一種理想的內(nèi)源性標志物[4],余洪立報導PETIA法測定血清胱抑素 C 當<150μmol/ L ,Hb < 112g/ L ,TG< 815mmol/ L時 ,結果不受干擾[3].
目前對文獻報導血清胱抑素 C測定有影響的因素較少,Newman認為甾體類激素治療可能對血清胱抑素 C測定有影響,但未說明有什么影響[5].向禮賢報導惡性腫瘤患者(如:結直腸癌)血清胱抑素 C可以升高,類風濕性關節(jié)炎用非甾體類抗炎藥和抗風濕類藥物治療病人血清胱抑素 C水平升高[1].
3、胱抑素CElisa試劑盒臨床應用
3.1胱抑素CElisa試劑盒在反映腎臟腎小球濾過率方面的應用
由于血清胱抑素 C以恒定速率釋放入血,*從腎小球濾過,在腎小管中幾乎全被吸收,上皮細胞將其*分解代謝,它既不返回血液循環(huán),也不分泌至腎小管,只經(jīng)腎臟排除,不受性別、飲食、炎癥和體質(zhì)量等因素的影響,因此反映GFR時具有*的優(yōu)勢。
3.2 在兒科疾病中的應用
由于小兒肌肉量少, 血肌酐(SCr )的測定結果很低, 致使SCr測定的度差, 因此, 4 歲以下兒童(SCr 的參考值2. 0——4. 0mg/ L) 難于通過用SCr 來測定有較小變化腎臟腎小球濾過率。另一方面, 1 歲以上兒童血清或血清胱抑素 C濃度已很穩(wěn)定,近于成人水平。所以血清胱抑素 C是反映兒童GFR 受損的靈敏標記物,更適應兒童腎病患者的診斷。
3.3 在糖尿病中的應用
約三分之一的糖尿病患者發(fā)展為腎衰需要腎透析,必須以可靠的腎臟腎小球濾過率清除率來評價糖尿病患者的腎功能狀況。臨床通常以檢測SCr來評估GFR ,而SCr對輕度的腎功能損傷缺乏足夠的靈敏度并存在盲區(qū),血清胱抑素 C能對輕度的腎功能損傷反應靈敏,并對檢測GFR 有較好的相關性,所以在糖尿病患者中定期檢測血清胱抑素 C可以動態(tài)觀察病情的發(fā)展。
3.4 在中的應用
對于的病人很可能導致腎功能損害,因為藥物對腎小管有一定的損傷,當腎功能受到損害時,藥物更容易積蓄并導致多方面的毒副作用,因此對進行藥物治療的病人及時關注其腎臟功能的狀況,以適當調(diào)整藥物劑量。一些研究[1——3]一致地認為對病人檢測血清胱抑素 C比檢測SCr更有意義。
3.5 在心血管疾病中的應用[6]
胱抑素C 參與了心血管系統(tǒng)諸多的病理、生理過程,它的作用機制涉及抗炎、抑制酶原與激素前體的活性等,而且由于它產(chǎn)生的恒定性,有可能在某些心血管疾病中成為診斷與檢測的分子指標。
3.6 在腎移植中的應用
腎臟腎小球濾過率可作為衡量急、慢性排斥對免疫抑制藥物的腎毒性觀察指標之一,用一敏感、可靠和簡便的指標來檢測GFR 的變化對移植腎患者是極為有效的診斷工具,而胱抑素 C 無疑是比肌酐更為敏感的GFR的檢測指標。
3.7 在診斷腎源性胸水方面的應用
引起胸水的原因很多,如腎源性,肝源性,心源性,炎癥,腫瘤及內(nèi)分泌代謝等。從多種病因中鑒別出腎源性胸水往往比較困難。Donej等用同一種方法同時測定血清和胸水中的血清胱抑素 C的濃度,發(fā)現(xiàn)在漏出性胸水中,血清血清胱抑素 C和胸水血清胱抑素 C均明顯升高,且兩者比值接近1.0,為腎源性胸水(r=0.954),而非其他原因所致的胸水。腎功能不全患者合并胸水,若為滲出液,兩者均明顯升高,尿毒癥性胸膜炎可能性大。兩者比值很高或很低,可以排除腎源性胸水的診斷。
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