公司細胞廣泛用于國內(nèi)院校的細胞生物學研究，作為實驗項目研究。下列產(chǎn)品詳細介紹：
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
肝癌細胞；HHCC | 貼壁生長 | EY-X63469 |
細胞名稱 肝癌細胞；HHCC
形態(tài)特性: 上皮細胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性:
培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS
傳代方法: 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況:
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 培養(yǎng)法（-）
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冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
己烷雌酚；去氫己雌酚SDF1 (D32F9) Rabbit mAb1,5-二氟-2,二
GTP;鳥苷-5‘-三酸鈉鹽Btk (C82B8) Rabbit mAb二亞酸甲酯
-5’-酸二鈉鹽SFRP1 (D5A7) Rabbit mAb綠原酸
尿苷-5’-二酸鈉鹽(UDP)GATA-1 (D52H6) XP® Rabbit mAb雙十二烷基二甲基
5’-尿苷酸二鈉(UMP)GATA-1 (D52H6) XP® Rabbit mAb間二(三氟甲基)
dAMP-Na2;脫氧腺苷酸二鈉eNOS (D8A6N) Rabbit mAb對叔丁基芐
ATP.Na2; 腺苷-5’-三酸二鈉鹽水合物β-Amyloid (D54D2) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 594 Conjuga)三氟甲基水楊酸
阿帕替尼甲磺酸鹽CD7 Antibody1-*基咪唑-甲
cAMP;環(huán)酸腺苷,環(huán)腺苷酸,環(huán)腺苷CD27 (O323) Mouse mAb (FITC Conjuga)溴-1-丁
環(huán)酸腺苷,環(huán)腺苷酸(標準品)Phospho-Btk (Ser180) (3D3) Mouse mAbN'-Cbz-L-
PR-619; 2,6-二氨基-3,5-二硫基吡啶GLI1 (C68H3) Rabbit mAb1H-咪唑-4,5-二甲酸二甲酯
5'-胞苷酸(CMP)GLI1 (C68H3) Rabbit mAb紫杉
5-甲酰水楊酸Rab11 Antibody
D-核糖-5-酸二鈉鹽Phospho-NPM (Thr199) Antibody氟-甲氧基溴芐
蘇木色精，蘇木素NPM Antibody3,4,5-三吡啶
核苷酸5’-一酸腺苷鈉鹽;AMP鈉鹽Bit1 Antibody2--6-基吡啶
CTP.Na2；胞苷-5’-三酸二鈉鹽SLP-76 (D1R1A) Rabbit mAb (PE Conjuga)卓
5-甲基尿苷FABP4 (D25B3) XP® Rabbit mAb氧基鹽酸鹽
2,2’-脫水尿苷；環(huán)尿苷FABP4 (D25B3) XP® Rabbit mAb三氟磺酸甲酯
X-gal;5-溴-4-3吲哚基β-D半糖* Antibody2-氨基-6-吡
X-GlcA ;5-溴--吲哚基-β-D-葡糖苷酸環(huán)己鹽CD8α (2.43) Rat mAb (FITC Conjuga)2-氨基-5-吡
X-GlcA ;5-溴--吲哚基-β-D-葡糖苷酸環(huán)己鹽Arf6 Antibody1,12-二溴十二烷
TOPS；N-基-N-（磺基）-鈉鹽Rab5 (C8B1) Rabbit mAb三氟甲磺酸鋰
TBHBA；2,4,6-三溴-羧基甲酸Rab5 (C8B1) Rabbit mAbBOC-1,丁
N-基-N-（磺基）-甲氧基鈉鹽Phospho-GSK-3β (Thr390) Antibody1-溴-2-丁炔
TOOS；N-基-N-（2-羧基-磺基）-鈉鹽PP2C-α (D18C10) XP® Rabbit mAb6-溴-2-萘甲酸甲酯
TMB.HCL；3,3’，5,5’-四甲基聯(lián)鹽酸鹽PP2C-α (D18C10) XP® Rabbit mAb2-氨基-羥基吡啶
TMB-PS；N-(磺基)-3,3',5,5'-四甲基聯(lián)鈉鹽（超純）LARS (D7Q4Q) Rabbit mAb噻唑-甲
ADOS；N-基-N-（2-羧基-磺基）-甲氧基鈉鹽PIAS1 (D33A7) XP® Rabbit mAb6-溴吡啶-2-甲
熒光PIAS1 (D33A7) XP® Rabbit mAb溴-2-甲
AEC；氨基-9-基咔唑Mer (D21F11) XP® Rabbit mAb (Sepharose®Bead Conjuga)四丁基氫化銨
-1-萘酚(4C1N)Erk5 (D23E9) Rabbit mAb甲氧基-2-甲酸
對甲藍(BCIP)Zyxin Antibody2,吡啶二甲酸
對酸二鈉（PNPP）Phospho-c-Cbl (Tyr731) Antibody1-辛-
ONPG；鄰-β-D-半糖苷Phospho-c-Cbl (Tyr731) Antibody2,6-二甲氧基甲
親和素；卵白素來源于雞蛋白Phospho-c-Cbl (Tyr774) Antibody3,5-二甲基-溴吡唑
PC3] F12K優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%
肝癌細胞；HHCC人高遷移率族蛋白1(HMG-1)ELISA試劑盒MHBELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
人水通道蛋白2(AQP-2)ELISA試劑盒MHBELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
人水通道蛋白0(AQP-0)ELISA試劑盒MHC/BELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
人水通道蛋白1(AQP-1)ELISA試劑盒MHC/BoLAELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
人水通道蛋白3(AQP-3)ELISA試劑盒MHC/DLAELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
人水通道蛋白4(AQP-4)ELISA試劑盒MHC/ELAELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
人水通道蛋白5(AQP-5)ELISA試劑盒MHC/GPLAELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
人髓磷脂性蛋白(MBP)ELISA試劑盒MHC/OLAELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過細胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化；或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來，吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yǎng)液，吹打下細胞，即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長，未及吹打細胞，細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉淀細胞，盡量去除細胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞，即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
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