細(xì)胞名稱 乳腺癌細(xì)胞;BC-025
形態(tài)特性: 上皮樣細(xì)胞
生長特性: 貼壁生長
特征特性: BC-025乳腺癌細(xì)胞由中國人種乳腺癌組織經(jīng)培養(yǎng)選擇獲得,于2007年建立鑒定,是乳腺癌基礎(chǔ)研究和臨床研究的材料。
培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS;50u/ml試劑胰島素
傳代方法: 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況: C14
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性?
產(chǎn)品名稱 | 乳腺癌細(xì)胞;BC-025 |
生長特性 | 貼壁生長 |
貨號 | EY-X63675 |
產(chǎn)品特點(diǎn):
1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。
2、 可以處理各種細(xì)菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長至60%~70%融合時,用0.25%消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生的細(xì)胞,以0.25%消化成單細(xì)胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生的細(xì)胞用消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。
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Glycozolinine
CAS No.:5257-08-9
中文名:
分子式:C13H11NO
五味子 訂購|咨詢 結(jié)合珠蛋白(Hpt) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial
丹參 B 訂購|咨詢 結(jié)合珠蛋白(Hpt) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial
藥根 訂購|咨詢 結(jié)合珠蛋白(Hpt) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg/vial
天素 訂購|咨詢 結(jié)合珠蛋白(Hpt) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial
黃芪苷 訂購|咨詢 結(jié)合珠蛋白(Hpt) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial
蘇枋精 訂購|咨詢 結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移關(guān)聯(lián)基因1(MACC1) 規(guī)格: HPLC≥98%,10mg/vial
三萜環(huán)黃氏 訂購|咨詢 結(jié)蛋白(Des) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial
二氫辣椒素 訂購|咨詢 結(jié)蛋白(Des) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial
次 訂購|咨詢 結(jié)蛋白(Des) 規(guī)格: 10mg
丹D 訂購|咨詢 結(jié)蛋白(Des) 規(guī)格: 10mg
牡荊素葡萄糖苷 訂購|咨詢 結(jié)締組織生長因子(CTGF) 規(guī)格: 20mg
異補(bǔ)骨脂二氫黃 訂購|咨詢 結(jié)締組織生長因子(CTGF) 規(guī)格: 10mg
漆黃素 訂購|咨詢 結(jié)締組織生長因子(CTGF) 規(guī)格: 20mg
香醛 訂購|咨詢 結(jié)締組織生長因子(CTGF) 規(guī)格: 20mg
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1羥基2,3,4,7四氧基山山 訂購|咨詢 結(jié)締組織生長因子(CTGF) 規(guī)格: 10mg
IFI78/MX1 干擾素誘導(dǎo)蛋白P78抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Cyproterone acetate
ADA/Adenosine deaminase 腺苷脫酶抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Megestrol base
Cryopyrin/CIAS1/NALP3 細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)蛋白NALP3抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Megestrol base
Cyclin B2 周期素B2抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Estradiene dione3keta
PRX/periaxin 軸周蛋白PRX抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Sorafenib base
Calumenin/CALU 鈣腔蛋白 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Histamine phosphate
CD98 CD98重鏈抗原抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Chloroquine diphosphate
Emerin Emerin蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml ()Hyoscyamine
鉛 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Lead 含量:AR,52.5%
鉛粒 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Lead 含量:AR,98%
鉛片 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Lead 含量:AR,87%
茜素羧絡(luò)合劑 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Alizarincomplexon 含量:BR,97.5%
茜素紅S 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Alizarinred 含量:FMP,50%
茜素藍(lán)S 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:AlizarinblueS 含量:高純,80%
嵌二萘 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Pyrene 含量:LR,98%
羥50%水溶液 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Hydroxylaminesolution 含量:AR,98%
羥基倍他環(huán)糊精 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:HPCD 含量:超純,99%
羥基環(huán)戊 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Cyclopentanol 含量:AR,99%
乳腺癌細(xì)胞;BC-025巧克力瓊脂平板(9cm)規(guī)格:10個/包用途:用于嗜血桿菌、奈瑟氏菌分離培養(yǎng)
MRS瓊脂平板(9cm)規(guī)格:10個/包用途:用于食品中乳菌總數(shù)測定
假單胞菌瓊脂培養(yǎng)基F規(guī)格:250g用途:用于銅綠假單胞菌的熒光素測定
無菌采樣袋(45cm*55cm)規(guī)格:50個/包用途:用于樣品的采樣
Casman瓊脂培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于嗜血菌屬的分離培養(yǎng)
可溶性淀粉培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于微生物的淀粉水解試驗(yàn)