細胞名稱 低分化肺腺癌細胞；GLC-82[GLC82]
形態(tài)特性: 上皮細胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞源自一位患有肺腺癌的58歲的中國女性；原代培養(yǎng)，7天細胞開始生長，*傳代84天，培養(yǎng)24個月；該細胞呈多邊形；免疫抑制昆明小鼠及Wistar斷奶大鼠癌細胞懸液皮下接種成功。STR檢測發(fā)現(xiàn)該細胞被HeLa細胞污染。
培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
傳代方法: 1:5~1:10傳代，建議初始濃度為2~4×104cells/cm2；2~3天換液1次。
傳代情況: C5
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 培養(yǎng)法（-）
公司細胞廣泛用于國內(nèi)院校的細胞生物學(xué)研究，作為實驗項目研究。下列產(chǎn)品詳細介紹：
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
低分化肺腺癌細胞；GLC-82[GLC82] | 貼壁生長 | EY-X63271 |
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冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量 生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過細胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化；或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來，吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yǎng)液，吹打下細胞，即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長，未及吹打細胞，細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉淀細胞，盡量去除細胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞，即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
吉氏色素,姬姆氏色素Histone H1.4 (D4J5Q) Rabbit mAb鹽酸
6-FAM, SE;6-羧基熒光素琥珀酰亞酯Cyclin E2 Antibody吡咯烷-甲酸
6-FAM ；6-羧基熒光素Cyclin E2 Antibody1-Boc-吡咯烷甲
吖啶黃素Phospho-Cyclin B1 (Ser133) (9E3) Rabbit mAb三鹽酸鹽
5-FAM ；5-羧基熒光素Phospho-Stat4 (Tyr693) (D2E4) Rabbit mAb2-甲基-甲酸甲酯
黑色素(水溶)Cyclin B1 (V152) Mouse mAb*基膦
黑色素(溶）Phospho-Cyclin E1 (Thr62) Antibody-2-
7-羥基;傘形花內(nèi)酯（標(biāo)準(zhǔn)品）MTHFD2 (D8W9U) Rabbit mAbDL-蛋氨酸
化血紅素;血晶素Phospho-HSL (Ser565) Antibody1-甲基吡唑-甲酸
5- 羧基熒光素二酸酯；5-CFDAPhospho-HSL (Ser565) Antibody二甲基二酸
5(6)-羧基熒光素二酸酯Cyclin B1 Antibody溴-2-甲氧基
5-氨基熒光素Cyclin B1 Antibody氨基-2-萘甲酸
6-氨基熒光素Phospho-HSL (Ser563) Antibody2,2-二甲基-羥基
5(6)-氨基熒光素Phospho-HSL (Ser563) Antibody2,2-二甲基丁二酸
5-FAM, SE；5-羧基熒光素琥珀酰亞酯Phospho-Numb (Ser276) Antibody2-甲酸酯磺酰
5,6-FAM；5(6)-羧基熒光素RIP2 (D10B11) Rabbit mAb2,5-二
5(6)-FAM, SE; 5(6)-羧基熒光素琥珀酰亞酯Phospho-ALK (Tyr1096) Antibody硫代嗎啉 1,1-二氧化物鹽酸鹽
S-腺苷-L-蛋氨酸;S-腺苷Phospho-ALK (Tyr1078) Antibody1,1-環(huán)基二羧酸
磺間甲氧嘧啶Calpastatin Antibody溴酮
磺間甲氧嘧啶(標(biāo)準(zhǔn)品)Ubiquityl-Histone H2A (Lys119) (D27C4) XP® Rabbit mAb (PE Conjuga)環(huán)孢菌素
雷奈酸鍶Cleaved Notch1 (Val1744) (D3B8) Rabbit mAb1,1-二甲基脲
GDC-0941Cleaved Notch1 (Val1744) (D3B8) Rabbit mAb*基酸甲酯
L-165041AMPKβ2 Antibody溴-2-氟甲
鹽酸頭孢卡品酯AMPKβ2 Antibody
AMPKβ1/2 (57C12) Rabbit mAb酸甲酯
(標(biāo)準(zhǔn)品)AMPKβ1/2 (57C12) Rabbit mAbNG-甲基-L-
2，6-二靛酚鈉(DCIP)ADAM9 (D64B5) Rabbit mAb四噻吩
ADAM9 (D64B5) Rabbit mAb香豆靈酸甲酯
β-萘酚,異萘酚EGR1 (15F7) Rabbit mAb一水肌酸
氨基酚EGR1 (44D5) Rabbit mAb1,1'-聯(lián)-2-萘酚
鄰二酚EPAC1 (5D3) Mouse mAb3,5-二甲
間二酚EPAC2 (5B1) Mouse mAb巰基
對叔丁基鄰二酚PZR Antibody離子交換樹脂
(2-噻唑基偶氮)間二酚MTAP AntibodyD-高
鈷試劑(1-亞硝基-2-萘酚)DHX29 Antibody2,3,4,5,6-五氟甲酸
磺酚SPhospho-Glucocorticoid Receptor (Ser211) Antibody三
?上皮樣細胞生長特性: 貼壁生長Rat FGF15 Elisa Kit
小鼠雜交瘤細胞；4E-BP1形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 半貼壁生長sheep IL-4 Elisa Kit
小鼠雜交瘤細胞；ABL2形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 半貼壁生長Porcine MMP-2 Elisa Kit
小鼠雜交瘤細胞；Akt2形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 半貼壁生長Rat Cardiac Troponin T Elisa Kit
小鼠雜交瘤細胞；Akt3形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 半貼壁生長Rabbit IgM Elisa Kit
小鼠雜交瘤細胞；AMACR形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 半貼壁生長Rat Angiopoietin 2 (ANG2) Elisa Kit
低分化肺腺癌細胞；GLC-82[GLC82]小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒BNPELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA試劑盒BNPELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA試劑盒BovineacetoneELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
小鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒BovineCholicacidELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
小鼠腫瘤壞死因子β(TNF-β)ELISA試劑盒BovinelymphocytefactorELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
小鼠血小板生成素(TPO)ELISA試劑盒Bovinerudimentalbovineserumalbumincheck-upELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
小鼠血管內(nèi)皮細胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒BP180-AbELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)ELISA試劑盒BPELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
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